A agricultura orgânica necessita de novas ferramentas para combater pragas e doenças cujas características atendam aos critérios do cultivo orgânico de frutas e hortaliças. Neste contexto, o trabalho teve como objetivo o desenvolvimento de um meio de cultura de baixo custo, por meio da substituição da glicose e sais minerais industriais por melado de cana comercial. A cepa do fungo Trichoderma sp. foi cultivada em meio Batata Dextrose Ágar (BDA) em ambiente asséptico para uso e reserva. Posteriormente, o inóculo foi fragmentado e transferido para o meio líquido (5 litros), produzido com o acréscimo 2% (v/v) de melado de cana. O inóculo foi mantido em fermentador com agitação rotacional à 28 °C por 72 hrs. Após o período do desenvolvimento do microrganismo, o meio foi filtrado e os micélios foram separados da fração líquida. A eficácia da substituição foi comprovada a partir do desenvolvimento do fungo Trichoderma sp. no meio alternativo. Diante disso, conclui-se que é possível o desenvolvimento de um meio de cultura alternativo, acessível e viável para a produção do fungo e aplicação na agricultura.