OBJETIVO: O presente projeto teve como objetivo caracterizar, por meio de metodologias clássicas de Citogenética (coloração convencional por Giemsa, bandamento C e impregnação por nitrato de prata – Ag-NORs) exemplares oriundos de piscicultura da região de Santa Helena-PR. MÉTODOS: Foram analisados 6 espécimes, sendo 3 machos e 3 fêmeas, de Astyanax do grupo bimaculatus proveniente de uma piscicultura situada no município de Santa Helena-PR, sendo eles transportados vivos para o laboratório de Biodiversidade Cromossômica e Molecular da Universidade Tecnológica Federal do Paraná – Câmpus Santa Helena, para serem preparados para obtenção de cromossomos metafásicos segundo metodologias já descritas em literaturas. Foram utilizadas as metodologias de coloração convencional por Giemsa, bandamento C e Ag-NOR. RESULTADOS: Os resultados mostraram um número diploide de 2n=50, (10m+20sm+8st+12a, NF=88) tanto para macho, quanto para fêmeas, com bandas pálidas O bandamento C mostrou pouca heterocromatina, com bandas pálidas, presença de heterocromatina pericentrica nos pares 2, 5, 9, 11, 12, 16 e 20, e heterocromatina intersticial no par 4 e 8.E Ag-NORs simples localizadas na posição terminal no braço curto do par de cromossomos 20, característica plesiomórfica para este complexo. CONCLUSÕES: Os dados do presente estudo fornecem dados que auxiliam na citotaxonomia e sistemática do “clado Astyanax” reforçando a necessidade de revisões amplas, principalmente no complexo A. bimaculatus. Determinar qual ou quais espécies estão sendo criadas pode, além de maximizar a produção das pisciculturas locais, evitar a perda da variabilidade genética dos lotes naturais em decorrência da soltura na natureza de espécies/populações cultivadas, os dados deste estudo são prévios ainda, entretanto contribuem para a ampliação do conhecimento da evolução cariotípica do grupo.