Astyanax é um grupo de espécies de peixes, popularmente conhecidos como lambaris e/ou piabas, que apresenta uma diversidade grande e incertezas taxonômicas. Devido à suas características biológicas, na região Oeste do Paraná, muitas pisciculturas optaram por criar espécies do complexo Astyanax bimaculatus para comercialização como iscas vivas. Considerando a possibilidade de introdução destas espécies cultivadas e a possibilidade das mesmas serem distintas das encontradas naturalmente, o presente trabalho objetivou-se em, por meio de análises citogenéticas clássicas, caracterizar cromossomicamente as espécies encontradas em uma piscicultura do município de Santa Helena – PR. Observou-se por meio deste trabalho o número diploide (2n) igual à 50, sendo detectado heterocromatina pálida na maioria dos cromossomos, com apenas alguns que se destacam por ter uma marcação mais forte, mas regiões intersticiais e terminais dos braços. As Regiões organizadoras de nucléolos (NORs) foram identificadas como simples, estando no par (17). Fica evidente que os dados citogenéticos para astyanax trazem dados importantes na classificação e sistemática desse grupo de espécies.