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Utilização de sonda telomérica como marcador cromossômico em populações de Astyanax bimaculatus
Última alteração: 2018-11-29
Resumo
A utilização de marcadores cromossômicos moleculares tonou-se uma importante ferramenta para elucidar problemas de ordem taxonômica e evolutiva. Neste contexto, este trabalho teve como objetivo, por meio de Hibridiações in situ fluorescentes com sonda de sequência telomérica, a verificação de diferenças entre populações de Astyanax bimaculatus e a presença de possíveis Sítios Teloméricos Intersticiais (ITS). Os espécimes de Astyanax foram coletados em tributários do Lago de Itaipu, na bacia do Paraná III com auxílio de redes e tarrafas, e transportados vivos para o Laboratório de Ictiologia e Limnologia da Universidade Tecnológica Federal do Paraná – Câmpus Santa Helena, onde foram mantidos em aquários até serem eutanasiados a fim de obter a suspensão celular. Para desenvolver a FISH foi utilizada sonda telomérica TTAGGGn obtida pelos primers TTAGGG e CCCTAA em reação da polimerase em cadeia (PCR). A marcação das sondas deuse pelo Kit DIG-Nick Translation Mix (Sigma-Aldrich®), seguindo as recomendações do fabricante, a detecção da sonda foi feita utilizando rodamina e os cromossomos foram corados com DAPI. Não foram encontradas diferenças entre as populações, tanto quanto entre machos e fêmeas de uma mesma população. Nem todos os telômeros dos foram marcados pela sonda, e não foi evidenciado nenhum ITS.
Palavras-chave
Citogenética. Hibridização in situ fluorescente (FISH). Sítios Teloméricos intersticiais (ITS).