O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da adubação e luminosidade na produção de cumarina em folhas de Mikania glomerata, conhecida popularmente como guaco. As plantas foram cultivadas sob quatro tipos de fertilizantes (testemunha, adubo químico, esterco bovino e cama de aviário), além das condições luminosas (pleno sol e sob sombrite 50%).  Aos 120 DAP as folhas foram coletadas e levadas para extração e análise dos teores de cumarina. Após obtenção dos resultados, a dosagem de cumarina foi realizada por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE), com fluxo de 1 ml/min e fase móvel composta por água e acetonitrila. Os dados foram submetidos à ANOVA e comparados pelo teste de Tukey (p>0,05). Todas as plantas cultivadas sob alguma adubação apresentaram maior concentração de cumarina, em relação à testemunha. Os tratamentos compostos por adubos orgânicos apresentaram acréscimo na produção do princípio ativo de 24% (esterco bovino) e 33,4 (cama de aviário). Quanto a luminosidade, as plantas cultivadas ao sol apresentaram um teor de cumarina menor do encontrado em plantas cultivadas sob sombrite 50%. Os resultados obtidos auxiliarão os produtores no manejo adequado do guaco, garantindo uma padronização da matéria prima e agregando valor à produção.