Com a crescente utilização de biopolímeros, destaca-se a quitosana. A quitosana é caracterizado como um polímero natural linear e é obtido a partir da desacetilação da quitina. A quitosana possuí diversas propriedades interessantes, entre elas propriedades antimicrobianas e o favorecimento de mecanismos do tipo “cross-linking” em têxteis. O presente trabalho objetiva propor um método de avaliação de quitosana em têxteis, verificando quais parâmetros influenciam a fixação na fibra de algodão. Para tal, um método de quantificação de quitosana em banho foi adaptado utilizando o corante laranja BG-2R (CI RO 122) para construção da curva de concentração, sendo possível relacionar a concentração de quitosana em banho com a leitura em espectrofotômetro. Então o método estatístico Delineamento composto central rotacional (DCCR) foi utilizado no planejamento experimental e análise da influência das variáveis na funcionalização das amostras. Por fim foram feitas análises de atividade microbiana qualitativa com a utilização de Escherichia coli ATCC® 25922TM. O modelo de superfície de resposta se mostrou significativa com R² 0.8919 sugerindo uma otimização para o processo de funcionalização, que ficará como perspectivas futuras do trabalho, entretanto as amostras não apresentaram atividade antimicrobiana.