Portal de Eventos Científicos da UTFPR (EVIN), XXIV Seminário de Iniciação Científica e Tecnológica da UTFPR

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Obtenção da proteína N-acetilneuraminato sintase (NANS) de Homo sapiens por expressão heteróloga
JOYCE ARAUJO DE OLIVEIRA, ROBSON RODRIGO MIRANDA, MARCIO SILVA

Última alteração: 2020-05-21

Resumo


O gene NANS de organismo Homo sapiens é responsável pela codificação de enzima N-acetiuneuraminato sintase (NANS), que participa da via biossintética dos ácidos siálicos. Essa enzima utiliza os substratos N-acetilmanosamina 6-fosfato e manose 6-fosfato para gerar o ácido N-acetilneuramínico (Neu5Ac, ácido siálico).  Estudos indicam que mutações nesse gene afetam a síntese mediada pelo NANS. Por consequência do mau funcionamento da enzima o desenvolvimento do cérebro e esqueleto é afetado, provocando um quadro de nanismo e retardo mental.  Diante disso, propõe-se o estabelecimento de um protocolo de expressão de maneira heteróloga em Eschericha coli BL21-DE3, da proteína NANS. Adicionalmente a esse trabalho foi feito um estudo teórico estrutural dessa proteína através da modelagem por homologia. Para o teste de expressão, inicialmente foi feita a transformação bacteriana por eletroporação, em que foi utilizado o plasmídeo vetor pET-15b preparado com as enzimas de restrição Xho I e BamH I. Como resultado obteve-se que a transformação não foi totalmente efetiva, portanto, não foi possível analisar a expressão da proteína heteróloga até o momento.  Porém, o modelo homólogo construído agregou mais conhecimento sobre a estrutura da enzima NANS, bem como pode-se simular as mutações presentes nessa enzima através da construção de um segundo modelo.


Palavras-chave


NANS. Estrutura. Homóloga.

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