No cenário atual, é importante utilizar alternativas da linha de produção de biocombustíveis que buscam produtos cada vez mais sustentáveis. Neste trabalho, utilizamos duas estratégias de pré-tratamento do resíduo agroindustrial, palha de milho, para o processo de produção do etanol de segunda geração: i) o uso de um pré-tratamento alternativo que permita reutilizar o agente químico e ii) o reciclo de enzimas. Para realizar o estudo foi feita uma divisão das etapas até o momento, com outras etapas numa perspectiva futura. A primeira etapa se baseou no pré-tratamento de palha de milho com soluções aquosas de ácido, de base e de eletrólito volátil, para que posteriormente sejam realizados ensaios hidrolíticos enzimáticos, utilizando estas biomassas pré-tratadas.