O objetivo do trabalho foi avaliar a ação do óleo essencial de Melaleuca (0,75%) sobre a longevidade de abelhas operárias de A. mellifera. O experimento foi conduzido a partir da obtenção de operárias de favos de cria operculada. Os tratamentos utilizados para os testes foram: T1: Água destilada esterilizada (controle) e T2: Solução de óleo essencial de Melaleuca a 0,75%. Foi realizado o bioensaio de pulverização direta dos tratamentos sobre as abelhas, para isso, operárias recém emergidas foram anestesiadas com CO₂, e colocadas em caixas gerbox onde foram pulverizadas com os tratamentos e posteriormente transferidas para gaiolas de PVC, com pasta candi e algodão embebido em água. O experimento foi mantido em sala climatizada (27± 2°C, U.R. 60 ± 10%, fotofase 12h) onde foram realizadas avaliações, quanto a mortalidade, entre duas até 120 horas após a exposição. As abelhas pulverizadas com solução contendo óleo essencial de Melaleuca apresentaram redução na longevidade quando comparadas ao tratamento controle. Após 36 horas da exposição, a sobrevivência era menor que 50% no tratamento com óleo essencial, enquanto para o controle era superior a 75%. Nas condições laboratoriais testadas, o óleo essencial de Melaleuca a 0,75% ocasiona redução na longevidade de operárias de A. mellifera.