O trabalho desenvolvido teve como objetivo avaliar a atividade antifúngica da levedura Hansenula wingei sobre os fungos filamentosos Aspergillus ochraceus e Penicillium expansum. A levedura foi reativada e cultivada para obtenção de metabólitos na forma de extrato bruto, purificada parcialmente por ultrafiltração, formando as frações 1 e 2, de moléculas maiores e menores que 30 kDa, respectivamente, seguido de ensaio antifúngico, contagem de esporos germinados e medição de comprimento de hifas. As menores porcentagens de germinação ocorreram no Extrato Bruto e na fração 2, para ambos os fungos, enquanto a Fração 1 teve porcentagens de germinação muito próximas aos do controle. No desenvolvimento de hifas os menores valores também foram encontrados no Extrato Bruto e na Fração 2, enquanto a Fração 1 teve o maior desenvolvimento, sugerindo que o(s) composto(s) de interesse se encontram entre as moléculas de massa menor que 30 kDa. Foi observada a presença de toxina killer no cultivo de Hansenula wingei e os testes mostraram que essa toxina é eficiente não só na inibição da germinação de esporos, mas também retarda o desenvolvimento de hifas nos esporos já germinados.