Este estudo objetivou verificar o impacto das rodovias na fauna de vertebrados do município de Santa Helena, PR, mapeando a localização das carcaças e identificando-as taxonomicamente. Foram feitos levantamentos quinzenais de todas as carcaças de vertebrados encontradas nas rodovias PR495 (17,2 km), PR488 (35,2 km) e PR317 (5,1 km) no período de março de 2017 a março de 2018, totalizando 1.552 km percorridos. Todas as carcaças encontradas foram georreferenciadas, fotografadas para posterior identificação taxonômica por especialistas. Os percursos a procura das carcaças foram feitos utilizando motocicleta na velocidade média de 50 km/h verificando um lado da rodovia por vez. Foram encontradas 163 carcaças de animais pertencentes a 33 espécies, sendo 119 de animais silvestres, 42 domésticos e dois não identificados devido ao avançado estado de decomposição. Foram 101 carcaças de mamíferos, 42 de aves, 16 de répteis e duas de anfíbios. O trecho com maior incidência de atropelamentos foi a PR488 com 87 carcaças seguido pela PR495 com 71 e a PR317 com cinco. Dezembro foi o mês de maior incidência de atropelamentos e janeiro e fevereiro o de menor incidência. Didelphis aurita (Wied, 1826) foi a espécie com maior quantidade de indivíduos atropelados (39). Foi encontrada uma carcaça de Puma yagouaroundi (Geoffroy, 1803) (Felidae), espécie em estado de vulnerabilidade em nível nacional. Os resultados demonstram o impacto das rodovias sobre a fauna local, principalmente a silvestre, e a necessidade de estratégias para diminuir a morte de animais em rodovias.