O mapeamento físico, por hibridização in situ fluorescente (FISH), vem sendo utilizado com grande frequência em estudos citogenéticos de peixes neotropicais por auxiliar na resolução de problemas de ordem taxonômica, biogeográfica e filogenética. Este trabalho tem como objetivo realizar a detecção cromossômica do microssatélite (GATA)_n em espécies/população cultivadas e naturais do complexo Astyanax bimaculatus coletados na região de influência do Lago de Itaipú. Os espécimes foram coletados e transportados vivos para o Laboratório de Ictiologia e Limnologia da Universidade Tecnológica Federal do Paraná – Câmpus Santa Helena. Nos cromossomos, a sequência (GATA)_n foi mapeada usando FISH, sob estringência de 77%, e a sonda foi obtida e marcada via PCR. Os resultados revelaram a presença deste elemento repetitivo disperso pelos cromossomos de todas as populações analisadas, com pelo menos um par de cromossomos metacêntricos marcados na porção pericentromérica em todas as espécies/populações. Pelo fato de outros autores terem encontrado a sequência de microssatélite (GATA)_n com distribuição diferente da encontrada por nós para as populações analisadas no presente trabalho, podemos inferir que esta sequência é um excelente marcador cromossômico em Astyanax.